尖吻蝮蛇毒组分Ⅰ对人口腔鳞状细胞癌HN4细胞凋亡及自噬的影响

更新时间:2023-05-28

【摘要】目的探索尖吻蝮蛇毒组分Ⅰ(AAVC-I)在人口腔鳞状细胞癌中促进细胞凋亡的作用及对自噬的影响。方法将所培养的人口腔鳞癌HN4细胞随机分为4组:对照组,AAVC-I低浓度组(2.5μg/mL),AAVC-I中浓度组(5μg/mL),AAVC-I高浓度组(10μg/mL)。将尖吻蝮蛇毒组分I冻干粉溶于培养基中,在肿瘤细胞的对数生长期加入不同浓度AAVC-I,对照组给予相应剂量的溶剂,24 h后取标本,MTT检测肿瘤细胞的抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Western blot及免疫组织化学染色法检测Caspase-3蛋白的表达情况,采用JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,免疫荧光法检测自噬微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白的表达。结果与对照组相比,给予AAVC-I低、中、高不同浓度干预后,肿瘤细胞的增殖受抑制(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.01),肿瘤细胞Caspase-3表达量增加(P<0.05),线粒体膜电位下降(P<0.05),免疫荧光显示LC3的表达量增加(P<0.05),并呈浓度依赖性。结论 AAVC-I可以抑制口腔鳞状细胞癌HN4细胞的增殖,可能机制为线粒体膜电位改变及Caspase-3蛋白的表达增加有关,同时AAVC-I增加自噬活性。

【关键词】 尖吻蝮蛇毒组分Ⅰ 口腔鳞状细胞癌HN4细胞 半胱氨酸蛋白酶-3 凋亡 自噬

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